Expression

Eine weitere Kerntechnologie der evocatal liegt in der Optimierung der Proteinexpression durch kombinatorische Ansätze. Unsere Auswahl an Produktionsstämmen und der Einsatz etablierter molekularbiologischer Tool-Boxen ermöglichen die großtechnische Produktion der Biokatalysatoren.

Expressionssysteme

Die evocatal GmbH verfügt über verschiedene Mikroorganismen, darunter die etablierten Stämmen Escherichia coli und Bacillus subtilis, die durch den Einsatz maßgeschneiderter Expressionssystemen zu effizienten Produktionsorganismen entwickelt wurden. Hierbei wird, neben den weiter unten beschriebenen Technologien (siehe Sekretion und Chaperone), beispielsweise die Promotorstärke oder die mRNA-Stabilität optimal an das zu produzierende Targetprotein angepasst. Alle Produktionsstämme können im industriellen Maßstab eingesetzt werden.

Sekretion

Ein Schlüssel zu einer effizienten Proteinsekretion ist die Wahl eines geeigneten Signalpeptids, welches spezifisch für jedes Targetprotein identifiziert werden muss. evocatal verfügt über mehr als 800 Signalsequenzen aus verschiedenen Mikroorganismen, die randomisiert mit einem beliebigen Targetprotein fusioniert werden können. Bei der Suche nach dem geeigneten Signalpeptid wird unsere moderne HT-Screening Technologie eingesetzt. In der Regel lässt sich die Sekretionseffizienz mit dieser Technologie signifikant steigern, auch im industriellen Maßstab.

Chaperone

Oft neigen rekombinant exprimierte Proteine zu einer Aggregatbildung, so dass kein korrekt gefaltetes Protein, bzw. nur eine geringe Menge, gewonnen werden kann. Molekulare Faltungshelfer, die so genannten Chaperone, können die Aggregatbildung verhindern. Es ist allerdings nicht vorhersehbar, welche Chaperonkombination für ein bestimmtes Targetprotein das beste Resultat erzielt. Das bedeutet, dass jeder Ansatz neu optimiert werden muss. evocatal verfügt über 73 verschiedene Chaperone aus drei verschiedenen Mikroorganismen, die einzeln oder in Kombinationen coexprimiert werden können. Anschließend kann der effizienteste Produktionsstamm identifiziert werden. Auch eine Integration der Chaperone in einen kundeneigenen Produktionsstamm ist möglich. Mit dieser zum Patent angemeldeten Technologie können signifikante, bis zu vierfache Steigerungen der Proteinausbeute erzielt werden. Weiter

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